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                                                                奧林巴斯顯微鏡:熒光和相襯的組合

                                                                2019-06-12 19:13:21 57

                                                                光漂白的影響減到最小,熒光顯微鏡可以不破壞與其他技術相結合的熒光染料,如微分干涉相差DIC),霍夫曼調制對比度(HMC),傳送暗場照明,相位相反的。

                                                                fluorophase

                                                                我們的想法是找到一個感興趣的具體領域使用非破壞性的對比度增強技術,然后在一個標本,沒有搬遷的標本,在顯微鏡切換熒光模式。這種類型的一個典型的實驗的結果示于圖1。圖1(a)示出了使用相位對比光學成像的3T3成纖維細胞的單層組織培養。細胞行成立由美國國立衛生行瑞士小鼠胚胎細胞,這是高度接觸抑制和有用的研究,涉及形成肉瘤病毒和白血病病毒傳播。的顯微照片,圖1(b)中示出的相同的視場,但是這一次成像使用熒光照明(汞蒸氣燈和一個奧林巴斯吳過濾器立方體)的細胞染色的熒光染料4',6 - 二脒基-2 - 苯基吲哚(DAPI ),具有最大發射波長在461納米,這是用來選擇性地染色細胞核和染色質的核酸特異性染料。圖1(c)示出這兩種技術的組合使用,以產生熒光染3T3細胞核的成纖維細胞的細胞膜和細胞器內部的相位對比度的圖像疊加在一個美麗的顯微照片。此圖片是記錄一個專門的螢石目標相環的設計允許同時觀察熒光和相襯的目標是一致的。

                                                                phasefluoro

                                                                在圖2中示出在顯微鏡的配置通常利用同時圖像標本同時使用相襯和熒光照明。相襯進行使用透射光所提供的鎢鹵燈的位置連接到顯微鏡的基礎上在一個燈箱。的視場光闌的光通過被反射到臺下聚光鏡由相位環形空間,并通過適當的尺寸。

                                                                ?

                                                                試樣衍射的光的相位板放置在物鏡后側焦點面上面的中間圖像平面與試樣未衍射的光通過干涉之前首先通過。同時,紫外線燈發出的由水銀燃燒器通過一個激勵器過濾器,然后由二向色鏡反射來自上述檢體上。二次發射的熒光通過附加的染色標本的發色基團被捕獲的物鏡和通過屏障過濾器,對準目鏡和/或光電管。此配置可用于圖像標本使用的技術(熒光,相位相反)單獨或結合使用。



                                                                電話咨詢
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