<sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>
      <address id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></address>

              <track id="hzrb1"></track>

                <thead id="hzrb1"><menuitem id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></menuitem></thead>

                  <sub id="hzrb1"></sub>

                          <sub id="hzrb1"></sub>

                              <sub id="hzrb1"></sub>

                              <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>

                                <nobr id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></nobr>

                                <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>

                                <sub id="hzrb1"></sub>

                                        <rp id="hzrb1"><big id="hzrb1"><th id="hzrb1"></th></big></rp>

                                        <th id="hzrb1"></th>

                                        <track id="hzrb1"></track>

                                        <address id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></address> <track id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></track>

                                            <track id="hzrb1"></track>

                                            <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>
                                            <thead id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></thead>
                                            <sub id="hzrb1"></sub>
                                            <sub id="hzrb1"></sub>
                                              <track id="hzrb1"></track>
                                                <sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><cite id="hzrb1"></cite></meter></sub>

                                                    <address id="hzrb1"></address>

                                                      <sub id="hzrb1"></sub>

                                                      <sub id="hzrb1"></sub>

                                                        <listing id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></listing>

                                                        <ins id="hzrb1"></ins>

                                                          <th id="hzrb1"></th>

                                                                <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                <th id="hzrb1"></th>
                                                                <th id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><listing id="hzrb1"></listing></progress></th>

                                                                <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><font id="hzrb1"></font></progress></sub><sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></meter></sub>

                                                                熒光顯微鏡技術

                                                                2019-06-12 19:20:30 75

                                                                顯微鏡光學技術對顯微結構與顯微變化是極為重要的工具.

                                                                熒光物質?(?熒光染劑?)?受到較短波長的光?(??FITC?:?Ex:488?nm?)?及足夠的能量所激發,?當要回到穩態的能階時,?會釋出較長波長的熒光?(??FITC?:?Em?:?515?nm?),?非熒光物質則成為黑色的背景.

                                                                自體熒光?(?auto-fluorescence?)又稱為主要熒光?(?primary?fluorescence?),?是物質本身無熒光染劑也能自體產生的熒光現象.,?一般,?此種熒光會影響實際要觀察的樣品,?或者,?其自體熒光會干擾覆蓋實際要觀察的熒光,?讓我們無法真正的判定熒光產生的物質及部位在那里??所以,?利用特定的熒光染劑來表現特定的物質與部位,?此種由染劑所釋出的熒光,?我們一般稱之為次級熒光?(?secondary?fluorescence?)

                                                                ?

                                                                 顯微鏡光路

                                                                ?

                                                                顯微鏡的熒光影像技術取決于下列主要因素?(?除了顯微鏡本身光學系統的優劣之外?)?:

                                                                1).?樣品處理

                                                                2).?熒光染劑?(?Fluorochrome?=?Fluorescent?dye?)

                                                                正確的選用熒光染劑,?必須將背景洗凈,?注意其熒光漂白時間,?也須留意其酸鹼值的變化.

                                                                新一代的染劑愈來愈多,??Multi-color?GFP,?DsRed,?nanocrystal…?etc.?在使用時,?必須特別注意所匹配的激發光源及感測的光譜范圍.熒光感測是仰賴感測光子的多寡.?愈多光子?(?Photon?),?熒光影像愈佳.

                                                                3).?激發光源?(?Light?sources?)

                                                                一般使用于熒光顯微鏡的激發光源有高壓汞燈及高壓氘燈

                                                                激發光源
                                                                 

                                                                高壓汞燈?(?Hg?50?W?–?使用交流電??Hg?100?W?–?使用直流電?)

                                                                高壓汞燈Hg?50?W一般都用于綠色或藍色的光譜范圍.?然而,?Hg?100W?能提供更為穩定的

                                                                光源,?所提供的強度更為均勻.,?較適宜光譜定量分析應用.

                                                                高壓?Xenon?(?Xenon?75?W?–?使用直流電)

                                                                高壓?Xenon燈能提供穩定的電流,?在連續的可見光光譜范圍,?Xenon燈提供較固定的光源平均強度.

                                                                所以,?一般都使用?Xenon燈于?UV,?Violet?及其綠色或藍色的光譜范圍.

                                                                燈泡式的光源缺點之一即是?:

                                                                光源都是全光譜分布,?每一波長的光源,?其強度都不是恒定,?且能量較低也不均勻分布,?

                                                                源強度也無法調整.?,?樣品及染劑的應用上,?頗難達到理想的控制.

                                                                共軛焦顯微鏡所采用的光源是雷射?(?Laser?).,?波長純一,?高能量.

                                                                4).?熒光濾鏡?(?Fluorescence?Filter?Cube?)

                                                                熒光激發塊
                                                                 

                                                                每一組熒光濾鏡基本上都包括了三個鏡片

                                                                1).?激發光濾鏡?(?Excitation?Filter?)

                                                                因為特定的染劑需要使用特定波長范圍的光來當作激發光源?(?才不致影響到其它不想要檢

                                                                視的物質被激發?)?而一般燈泡式的光源?(??Hg?50W,?Hg?100W,?Xe?75?W?),?所產生的光,?都含

                                                                蓋全波長?(?300?–?1200?nm?)?,?所以,?必須使用激發光濾鏡來篩選激發熒光染劑所須的光譜范圍

                                                                (?可為?Long-pass,?Band-pass,?Short-pass?).?激發光濾鏡是以特殊的鍍膜,?來產生可篩選波長的

                                                                功能.?例如?BP?450?–?490?nm,?即是僅讓?450?–?490?nm?間的光通過,?用以激發?FITC?染劑.

                                                                 

                                                                2).?分光鏡?(?Dichromatic?Mirror?或者?Beam?Splitter?)

                                                                將較短波長的激發光反射至樣品.

                                                                例如?RKP?510?nm,?即是,?510?nm?以下的光反射至樣品,?然而,?510?nm?以上的光可通過.

                                                                3).?釋放光濾鏡?(?Emission?Filter?或者?Suppression?Filter?)

                                                                受檢樣品中的特定染劑及其它物質被激發后,?所有被激發的物質都釋放出來較長波長的螢

                                                                ,?然而熒光僅能在釋放光濾鏡所選定的特定波長范圍內通過,?此通過的熒光即是我們所要

                                                                觀察的熒光影像.

                                                                例如?:?LP?510?nm,?即是,?熒光光譜超過?510?nm?,?都能通過濾鏡供觀察,?低于?510?nm?的螢

                                                                光則被阻擋看不到.

                                                                傳統的共軛焦顯微鏡所采用濾鏡轉盤?(?Filter?wheel?),?其內可安裝感測光濾鏡.

                                                                Leica?TCS?NT2?于每一個?PMT?,?皆可安裝?1?組濾鏡飛輪,?每一個飛輪可安裝最多達?7?

                                                                的濾鏡.

                                                                Leica?TCS?SP?則是以連續式的全波長分光光譜系統來取代傳統的濾鏡,?因為,?有限的濾鏡無

                                                                法滿足染劑的應用,?更無法滿足新一代染劑的使用.?使用可全波長感測的分光光譜系統,?

                                                                無限制的自訂各種感測光譜,?有如一組無限的濾鏡.?真正達到多工多用途與多使用者的目的.

                                                                 

                                                                5).?光學鏡頭解析

                                                                 鏡頭

                                                                鏡頭2
                                                                鏡頭的解析,?是熒光影像質量的重要影響因素之一,?基本上,?PL-Fluotar?及?PL-APO?級的油鏡能提供較好的光學穿透率.,?其中,?又以較高?NA?值?(?NA?值與鏡頭開口角度?α?成正比?)?的鏡頭為好.?(?鏡頭必須使用折射率?n=?1.518?immersion?oil,?一般鏡頭解析計算,?R?=?n˙?sinα?),?如?:?PL-APO?63x/1.32?Oil,?PL-APO?100x/1.40?Oil

                                                                同樣?100x?鏡頭,?如果使用次一級的?N?Plan?100x/1.25?Oil,?則因其?NA?較小,?色差與像差的修正都略遜于?PL-APO?100x/1.40?Oil鏡頭,?故,?熒光影像質量較差.,?在低強度的熒光影像鏡檢,?表現更是明顯.

                                                                所以,?熒光影像所使用的光學鏡頭依序考量應為?PL-APO,?PL-Fluotar,?N?Plan,?C?Plan,?Achromatic.

                                                                共軛焦顯微鏡建議使用專屬的鏡頭,?其于?R,?G,?B,?各作有特別的修正?(?correction?),?能提供最高的光學穿透與解析?(?Point-spread?resolution?).?,?其有別于一般鏡頭.

                                                                例如?:?PL-APO?63x/1.32?CS?Oil?(??CS?標示,?即代表?Confocal?System?專屬鏡頭?)

                                                                6).?熒光傳感器

                                                                基本上,?一般除了利用目鏡?(?Eyepiece?)?檢視之外,?絕大部份都使用相機?(?Camera?)??CCD?攝影機?來擷取熒光影像.

                                                                由于熒光影像一般都較弱,?故照相時,?依照熒光強度的強弱分布,?可能必須使用俱有點測光?(?Spot?metering?)??俱有長時間曝光的照相系統為考慮因素.,?然而,?CCD?攝影機則以大芯片?(?CCD?Chip?),?冷卻式?(?Cooled?),?對極低弱的光有較靈敏感應的黑白?CCD?攝影機為考慮因素.?

                                                                使用黑白?CCD?攝影機的原因之一是其比一般彩色?CCD?攝影機感光較為靈敏,?顯像解析較高.

                                                                如要取得彩色熒光影像,?則可通過影像擷取卡?(?Frame?Grabber?)?取像,?以數位影像方式,?利用軟件作?RGB?三原色套色即可?(?一般,?利用?Photoshop?軟件,?即可處理彩色套色?).?如要直接擷取實彩色熒光影像?(?True?Color?Image?),?則可加裝?RGB-濾鏡?即可.



                                                                電話咨詢
                                                                郵件咨詢
                                                                在線咨詢
                                                                QQ客服
                                                                北京pk10冠军算法

                                                                    <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>
                                                                    <address id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></address>

                                                                            <track id="hzrb1"></track>

                                                                              <thead id="hzrb1"><menuitem id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></menuitem></thead>

                                                                                <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                        <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                            <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                            <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>

                                                                                              <nobr id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></nobr>

                                                                                              <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>

                                                                                              <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                      <rp id="hzrb1"><big id="hzrb1"><th id="hzrb1"></th></big></rp>

                                                                                                      <th id="hzrb1"></th>

                                                                                                      <track id="hzrb1"></track>

                                                                                                      <address id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></address> <track id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></track>

                                                                                                          <track id="hzrb1"></track>

                                                                                                          <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>
                                                                                                          <thead id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></thead>
                                                                                                          <sub id="hzrb1"></sub>
                                                                                                          <sub id="hzrb1"></sub>
                                                                                                            <track id="hzrb1"></track>
                                                                                                              <sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><cite id="hzrb1"></cite></meter></sub>

                                                                                                                  <address id="hzrb1"></address>

                                                                                                                    <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                    <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                      <listing id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></listing>

                                                                                                                      <ins id="hzrb1"></ins>

                                                                                                                        <th id="hzrb1"></th>

                                                                                                                              <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                              <th id="hzrb1"></th>
                                                                                                                              <th id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><listing id="hzrb1"></listing></progress></th>

                                                                                                                              <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><font id="hzrb1"></font></progress></sub><sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></meter></sub>

                                                                                                                                  <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>
                                                                                                                                  <address id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></address>

                                                                                                                                          <track id="hzrb1"></track>

                                                                                                                                            <thead id="hzrb1"><menuitem id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></menuitem></thead>

                                                                                                                                              <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                      <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                          <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                          <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></sub>

                                                                                                                                                            <nobr id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></nobr>

                                                                                                                                                            <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>

                                                                                                                                                            <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                                    <rp id="hzrb1"><big id="hzrb1"><th id="hzrb1"></th></big></rp>

                                                                                                                                                                    <th id="hzrb1"></th>

                                                                                                                                                                    <track id="hzrb1"></track>

                                                                                                                                                                    <address id="hzrb1"><progress id="hzrb1"></progress></address> <track id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></track>

                                                                                                                                                                        <track id="hzrb1"></track>

                                                                                                                                                                        <th id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><dfn id="hzrb1"></dfn></meter></th>
                                                                                                                                                                        <thead id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></thead>
                                                                                                                                                                        <sub id="hzrb1"></sub>
                                                                                                                                                                        <sub id="hzrb1"></sub>
                                                                                                                                                                          <track id="hzrb1"></track>
                                                                                                                                                                            <sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><cite id="hzrb1"></cite></meter></sub>

                                                                                                                                                                                <address id="hzrb1"></address>

                                                                                                                                                                                  <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                                                  <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                                                    <listing id="hzrb1"><meter id="hzrb1"></meter></listing>

                                                                                                                                                                                    <ins id="hzrb1"></ins>

                                                                                                                                                                                      <th id="hzrb1"></th>

                                                                                                                                                                                            <sub id="hzrb1"></sub>

                                                                                                                                                                                            <th id="hzrb1"></th>
                                                                                                                                                                                            <th id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><listing id="hzrb1"></listing></progress></th>

                                                                                                                                                                                            <sub id="hzrb1"><progress id="hzrb1"><font id="hzrb1"></font></progress></sub><sub id="hzrb1"><meter id="hzrb1"><b id="hzrb1"></b></meter></sub>

                                                                                                                                                                                            韩国美女性感热舞 不输本金600不倒翁玩法 贵卅省十一选五开奖走势图 买3d彩票的技巧 北京pk赛车官网下载视频 欧洲联赛最新排名表 14足彩胜平负预测 武汉赖子麻将 天津时时五星彩走势图 浙江11选5的开奖图 浙江快乐彩一定牛 北京pk赛车历史结果 福彩3d第133期推荐 极速赛车开奖记录提前看 天津时时合法吗 大乐透开奖号码走势图